产品货号:
GS0130
中文名称:
DH5α感受态细胞
英文名称:
DH5α Competent Cells
产品规格:
10×100μL|20×100μL|100×100μL
发货周期:
1~3天
产品价格:
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E.coli DH5α在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化时,由于载体DNA产生的LacZα多肽和DH5α编码的lacZ△M15相结合,从而显示β-半乳糖苷酶活性(α-互补性)。利用这一特性,可以很容易鉴别重组体菌株。DH5α可以用于制作基因库、进行亚克隆等,由于DH5α具有decR变异,可以作为较大质粒的宿主菌使用。用于DNA的化学转化,使用pUC19质粒DNA检测,转化效率高达107cfu/μg DNA以上。
组分 | 10×100μL | 20×100μL | |
DH5α感受态细胞 | 10×100μL | 20×100μL | |
说明书 | 1份 |
保存:-80℃,有效期6个月。
基因型:
F-φ80 lac ZΔM15 Δ(lacZYA-arg F) U169 endA1 recA1 hsdR17(rk-,mk+) supE44λ- thi -1 gyrA96 relA1 phoA
- 使用1ng的质粒DNA进行转化时:100μL E.coli DH5α Competent Cells/1ng pUC19 Plasmid进行转化时产生的菌落数>107~108 transformants/1μg pUC19 Plasmid。
- 100μL的E.coli DH5α Competent Cells在含有100μg/mL Ampicillin的L-琼脂平板培养基上过夜培养40 hr不产生菌落。
- 感受态细胞一定要用干冰运输。感受态细胞应在-80℃下保存,不可多次冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。
- 所有步骤均在无菌条件下操作。
- 从-80℃冰箱内取出E.coli DH5α Competent Cells,迅速插入冰盒内,使其溶解。
- 加入DNA样品轻轻混匀,冰中放置30分钟。
- 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中放置2分钟左右,注意不要晃动。添加700μL不含抗生素的无菌培养基,混合均匀。
- 37℃振荡培养1小时(160~225rpm),吸取适量体积均匀涂布到含相应抗生素的LB琼脂培养基平板中。37℃正置至液体被吸收,然后倒置过夜培养。
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